24 priedas

1. Šis metodas taikomas natrio N-4-chlor-4-metilbenzensulfonamido (chloramino T) kiekiui nustatyti plonasluoksnės chromatografijos būdu kosmetikos gaminiuose.

2. Chloramino T kiekis bandinyje, nustatytas šiuo metodu, yra išreiškiamas masės procentais (m/m).

3. Chloraminas T visiškai hidrolizuojamas iki 4-toluensulfonamido susidarymo virinant su vandenilio chloridu. Susidaręs 4-toluensulfonamido kiekis nustatomas fotodensitometriškai plonasluoksnės chromatografijos būdu.

4. Reagentai. Jie turi būti naudojami analiziškai gryni.

4.1. Natrio N-4-chlor-4-metilbenzensulfonamidas (chloraminas T).

4.2. 4-toluensulfonamido etaloninis tirpalas: 50 mg 4-toluensulfonamido 100-e ml etanolio (4.5).

4.3. Vandenilio chloridas, 37 % (m/m), d = 1,18 g/ml.

4.4. Dietileteris.

4.5. Etanolis, 96% (t/t).

4.6. Judančiosios fazės tirpiklis

4.6.1. 1-butanolis, etanolis (4.5), vanduo (40: 4: 9; t/t/t) arba

4.6.2. chloroformas ir acetonas (6: 4; t/t).

4.7. Visiškai paruoštos naudoti plonasluoksnės chromatografijos plokštelės, silikagelis 60, be fluorescencinio indikatoriaus.

4.8. Kalio permanganatas.

4.9. Vandenilio chloridas, 15% (m/m).

4.10. Purškiamasis reagentas: 2-toluidinas, 1% (m/t) tirpalas etanolyje (4.5).

5. Priemonės

5.1. Įprastos laboratorinės priemonės.

5.2. Įprastos plonasluoksnės chromatografijos įranga.

5.3. Fotodensitometras.

6. Darbo eiga

6.1. Hidrolizė. 50 ml apvaliadugnėje kolboje tiksliai pasveriama apie 1 g mėginio (m). Įpilama 5 ml vandens, 5 ml vandenilio chlorido (4.3) ir vieną valandą virinama naudojant grįžtamąjį kondensatorių. Karšta suspensija tuoj pat vandeniu nuplaunama į 50 ml graduotą kolbą. Leidžiama atvėsti ir pripilama iki žymės vandens. Penkias minutes centrifuguojama ne mažiau kaip 3000 apsukų per minutę greičiu, paviršinis skystis filtruojamas.

6.2. Ekstrahavimas

6.2.1. Atmatuojama 30 ml filtrato ir tris kartus ekstrahuojama su 15 ml dietileterio (4.4). Jeigu reikia, eterinės fazės džiovinamos ir sumaišomos kartu 50 ml graduotoje kolboje. Iki žymės pripilama dietileterio (4.4).

6.2.2. Imama 25 ml išdžiovinto eterinio ekstrakto ir garinama iki sausumo azoto srovėje. Likutis dar kartą ištirpinamas 1 ml etanolio (4.5).

6.3. Plonasluoksnė chromatografija

6.3.1. 20 ml etanolinės liekanos (6.2) užlašinama ant plonasluoksnės chromatografinės plokštelės (4.7). Tuo pačiu metu ir tokiu pačiu būdu užlašinama 8, 12, 16 ir 20 ml etaloninio 4-toluensulfonamido tirpalo (4.2).

6.3.2. Po to ryškinama apytikriai 150 mm judančiosios fazės tirpikliu (4.6.1 arba 4.6.2).

6.3.3. Visiškai išgarinus tirpiklį, plokštelė dvi tris minutes laikoma chloro garuose, kurie susidaro uždarame inde, į jį įpylus apie 100 ml vandenilio chlorido (4.9) ant apytikriai 2 g kalio permanganato (4.8). Chloro perteklius pašalinamas kaitinant plokštelę iki 1000C temperatūros penkias minutes. Tada plokštelė apipurškiama reagentu (4.10).

6.4. Matavimas. Maždaug po valandos violetinės dėmės matuojamos fotodensito-metru, bangos ilgis – 525 nm.

6.5. Kalibracinių kreivių brėžimas. Brėžiamos kreivės: didžiausių smailių aukščio verčių, nustatytų keturioms 4-toluensulfonamido dėmėms, priklausomybė nuo atitinkamų 4-toluensulfonamido kiekių (t. y. 4, 6, 8, 10 mg 4-toluensulfonamido vienai dėmei).

7. Šį metodą galima kontroliuoti naudojant 0,1% arba 0,2% (m/t) chloramino T tirpalą (4.1), apdorotą tokiu pat būdu kaip bandinys (6 punktas).

8. Apskaičiavimas

Chloramino T kiekis mėginyje, išreikštas masės procentais, yra apskaičiuojamas pagal formulę: [formulė šaltinio tekste pateikta paveikslėliu – žr. e-tar.lt]

% (m/m) natrio N-4-chlor-4-metilbenzensulfonamido = ,

čia: 1,33 – 4-toluensulfonamido-chloramino – T konversijos koeficientas; a – 4-toluensulfonamido kiekis mėginyje (mg), nustatytas iš kalibracinių kreivių; m – paimto mėginio masė gramais.

9. Pakartojamumas. Jeigu chloramino T kiekis apytikriai sudaro 0,2% (m/m), to paties mėginio dviejų lygiagrečių nustatymų rezultatų skirtumas turi neviršyti absoliučios 0,03% (m/m) vertės.