26 priedas

I. ATPAŽINIMAS

1. Šis metodas taikomas nitritams, esantiems kosmetikos gaminiuose, ypač kremuose ir pastose, atpažinti.

2. Nitritų buvimą parodo su 2-aminobenzaldehido fenilhidrazonu (Nitrin®) susidarantys spalvoti dariniai.

3. Reagentai. Jie turi būti naudojami analiziškai gryni.

3.1. Praskiesta sieros rūgštis: 2 ml koncentruotos sieros rūgšties (d=1,84) praskiedžiama 11 ml distiliuoto vandens.

3.2. Praskiestas vandenilio chloridas: 1 ml koncentruoto vandenilio chlorido (d=1,19) praskiedžiama 11 ml distiliuoto vandens.

3.3. Metanolis.

3.4. 2-aminobenzaldehido fenilhidrazono (Nitrin® reagentas) tirpalas metanolyje. Pasveriama 2,0 g Nitrin® ir visas kiekis perpilamas į 100 ml matavimo kolbą. Įlašinami 4 ml praskiesto vandenilio chlorido (3.2) ir išmaišoma. Pripilama iki žymės metanolio ir maišoma, kol tirpalas pasidaro visai skaidrus. Tirpalas laikomas tamsaus stiklo butelyje (4.3).

4. Priemonės

4.1. Laboratorinės stiklinės, 50 ml.

4.2. Matavimo kolbos, 100 ml.

4.3. Tamsaus stiklo butelis, 125 ml.

4.4. Stiklinė plokštelė, 10 x 10 cm.

4.5. Plastikinė mentelė.

4.6. Filtravimo popierius, 10 x 10 cm.

5. Darbo eiga

5.1. Dalis mėginio tolygiai paskleidžiama ant stiklinės plokštelės (4.4), padengiant paviršių ne storesniu kaip 1 cm sluoksniu.

5.2. Filtravimo popieriaus lapas (4.6) sudrėkinamas distiliuotu vandeniu, uždedamas ant bandinio ir prispaudžiamas plastikine mentele (4.5).

5.3. Maždaug po minutės filtravimo popieriaus centriniame taške užlašinami: du lašai praskiestos sieros rūgšties (3.1), po to du lašai Nitrin® tirpalo (3.4).

5.4. Po 5–10 sekundžių filtravimo popierius nuimamas ir apžiūrimas dienos šviesoje. Nitritų buvimą rodo rausvai purpurinė spalva. Jeigu nitritų yra nedaug, rausvai purpurinė spalva po 5–15 sekundžių pasikeičia į geltoną. Kai nitritų kiekis yra didelis, spalva pasikeičia per 1–2 minutes.

6. Rausvai purpurinės spalvos intensyvumas ir trukmė, per kurią ji pasikeičia į geltoną, parodo nitritų kiekį mėginyje.

II. KIEKIO NUSTATYMAS

7. Nitritų kiekis, nustatomas pagal šį metodą, išreiškiamas natrio nitrito masės procentais mėginyje.

8. Mėginį praskiedus vandeniu ir nuskaidrinus, jame esantis nitritas reaguoja su sulfanilamidu ir N-1-naftiletilendiaminu, gautos spalvos optinis tankis yra matuojamas esant 538 nm bangos ilgiui.

9. Reagentai. Jie turi būti naudojami analiziškai gryni.

9.1. Skaidrikliai (šių reagentų negalima naudoti ilgiau nei vieną savaitę nuo jų pagaminimo).

9.1.1. I Carrez reagentas: 106 g kalio heksacianoferato (II) K4Fe(CN)6 × 3H2O ištirpi-nama distiliuotame vandenyje ir praskiedžiama vandeniu iki 1000 ml.

9.1.2. II Carrez reagentas: 219,5 g cinko acetato Zn(CH3COO)2. 2H2O ir 30 ml ledinės acto rūgšties ištirpinama distiliuotame vandenyje ir praskiedžiama vandeniu iki 1000 ml.

9.2. Natrio nitrito tirpalas: 0,500 g natrio nitrito ištirpinama distiliuotame vandenyje 1000 ml matavimo kolboje ir praskiedžiama vandeniu iki žymės. 10,0 ml šio pradinio etaloninio tirpalo skiedžiama iki 500 ml; 1 ml šio tirpalo = 10 mikrogramų NaNO2.

9.3. 1N natrio hidroksido tirpalas.

9.4. 0,2% sulfanilamido hidrochlorido tirpalas: 2,0 g sulfanilamido šildant ištirpinama 800 ml vandens. Atvėsinama ir maišant įpilama 100 ml koncentruoto vandenilio chlorido. Skiedžiama vandeniu iki 1000 ml.

9.5. 5 N vandenilio chloridas.

9.6. N-1-naftil reagentas. Šis tirpalas turi būti ruošiamas tą dieną, kai naudojamas. 0,1 g N-1-naftiletilendiamino dihidrochlorido ištirpinama vandenyje ir praskiedžiama vandeniu iki 100 ml.

10. Priemonės

10.1. Analizinės svarstyklės.

10.2. Matavimo kolbos, 100, 250, 500 ir 1000 ml.

10.3. Moro arba graduotos pipetės.

10.4. Matavimo cilindrai, 100 ml.

10.5. Lankstytasis filtravimo popierius, be nitritų, 15 cm skersmens.

10.6. Vandens vonia.

10.7. Spektrofotometras, kurio kiuvetės optinio kelio ilgis – 1 cm.

10.8. pH-metras.

10.9. Mikrobiuretė, 10 ml.

10.10. Laboratorinės stiklinės, 250 ml.

11. Darbo eiga

11.1. 0,1 mg tikslumu pasveriama 0,5 g (m gramų) homogenizuoto bandinio, kuris karštu distiliuotu vandeniu nuplaunamas į 250 ml laboratorinę stiklinę (10.10) ir juo praskiedžiamas apytikriai iki 150 ml. Laboratorinė stiklinė (10.10) įstatoma į 800C temperatūros vandens vonią (10.6) pusei valandos, stiklinėje esantis tirpalas kartais suplakamas.

11.2. Aušinama kambario temperatūroje ir maišant paeiliui įpilama 2 ml Carrez I reagento (9.1.1) ir 2 ml Carrez II reagento (9.1.2).

11.3. Įpilama 1 N natrio hidroksido tirpalo (9.3), kad pH būtų 8,3 (naudojamas pH-metras (10.8). Visas laboratorinės stiklinės turinys perpilamas į 250 ml matavimo kolbą (10.2) ir iki žymės praskiedžiamas distiliuotu vandeniu.

11.4. Sumaišoma ir filtruojama per lankstytąjį filtravimo popierių (10.5).

11.5. Tinkama švaraus filtrato alikvotinė dalis (V ml), bet ne daugiau kaip 25 ml, pipete įpilama į 100 ml matavimo kolbą (10.2) ir praskiedžiama distiliuotu vandeniu iki 60 ml.

11.6. Išmaišius įpilama 10,0 ml sulfanilamido hidrochlorido tirpalo (9.4), po to – 6,0 ml 5 N vandenilio chlorido (9.5). Išmaišoma ir leidžiama nusistovėti penkias minutes. Įpilama 2,0 ml N-1-naftil reagento (9.6), išmaišoma ir leidžiama nusistovėti tris minutes. Praskiedžiama vandeniu iki žymės ir išmaišoma.

11.7. Paruošiamas tuščiasis mėginys, pakartojant 11.5 ir 11.6 punktuose nurodytą darbo eigą, nepridedant N-1-naftil reagento.

11.8. Pagal 11.6 punktą gauto tirpalo optinis tankis matuojamas (10.7) esant 538 nm bangos ilgiui, etalonu naudojant tuščiojo mėginio tirpalą (11.7).

11.9. Kalibracinėje kreivėje (11.10) surandamas natrio nitrito kiekis mikrogramais 100 ml tirpalo (m1 mikrogramų), kuris atitinka optinį tankį, išmatuotą pagal 11.8 punktą.

11.10. Naudojant natrio nitrito tirpalą, kurio 1 mililitre yra 10 μg šios medžiagos (9.2), nubrėžiama kalibracinė kreivė tokioms natrio nitrito koncentracijoms: 0, 20, 40, 60, 80, 100 mg /100 ml tirpalo.

12. Apskaičiavimas. Natrio nitrito kiekis masės procentais bandinyje apskaičiuoja-mas pagal formulę: [formulė šaltinio tekste pateikta paveikslėliu – žr. e-tar.lt]

% NaNO2 = x m1 x 10-6 x =

čia: m – analizei (11.1) paimto mėginio masė gramais; m1 – 11.9 punkte nustatyta natrio nitrito masė mikrogramais; V – tyrime (11.5) sunaudoto filtrato tūris mililitrais.

III. PAKARTOJAMUMAS

13. Kai natrio nitrito kiekis sudaro 0,2% m/m, to paties mėginio dviejų lygiagrečių nustatymų rezultatų skirtumas turi neviršyti absoliučios 0,005% vertės.